Lieu : Centre Broca Nouvelle-Aquitaine
Gabriel Pitollat
Equipe : Développement et Neurobiologie des réseaux neuronaux (DN3) (Thoby-Brisson, Barrière)
Directrice de thèse : Muriel Thoby-Brisson
Titre
Syndrome d’hypoventilation centrale congénitale : Mécanismes physiopathologiques et recherche de traitements pharmacologiques sur un modèle animal
Résumé
Le syndrome d’Ondine, ou syndrome d’hypoventilation centrale congénitale (CCHS), est une maladie génétique rare, d’origine centrale, causée par une mutation hétérozygote du gène PHOX2B. Les principales manifestations cliniques sont une hypoventilation sévère associée à une perte quasi-totale de réponse ventilatoire à l’hypercapnie. À ce jour, la ventilation mécanique par canule de trachéotomie est la seule méthode de supplémentation respiratoire qui est utilisée pour contrebalancer ces déficits. Afin d’améliorer le confort de vie des patients, il est primordial de développer la recherche de molécules ayant de potentiels intérêts thérapeutiques. Dans cette optique, mes travaux de thèse ont été consacrés à tester in vitro, sur un modèle animal du CCHS (souris Phox2b27ala/+), les capacités d’agents pharmacologiques à compenser les déficits respiratoires liés à la mutation de Phox2b et d’en identifier les mécanismes d’action. Les paramètres respiratoires ont été mesurés par des enregistrements électrophysiologiques effectués en condition contrôle et après traitement pharmacologique sur préparations de tronc cérébral isolé contenant les réseaux neuronaux qui contrôle la respiration issues d’animaux porteurs de la mutation et de leurs congénères sauvages. (1) Trois composés agissant sur la signalisation des Heat Shock Protein (HSP) ont été étudiés, et plus particulièrement l’ATS-002, qui s’est avéré très efficace pour restaurer conjointement une fréquence de base et une réponse à l’acidose à des valeurs proches de celles obtenues sur des animaux contrôles. Les effets de l’ATS-002 sur la fréquence respiratoire sont médiés par une action indirecte, via la mise en jeu de la microglie sur l’activité générée par le complexe PréBötzinger qui est le réseau générateur du rythme respiratoire. Les mécanismes de la récupération de la réponse à l’acidose restent quant à eux encore mal identifiés, mais des expériences suggèrent que le noyau rétrotrapézoïde/groupe respiratoire parafacial, connu pour être anatomiquement et fonctionnellement affecté par la mutation de Phox2b et être un acteur majeur de la chémosensibilité centrale, ne serait pas impliqué. (2) Par une approche purement anatomique, je montre aussi chez le mutant que la microglie du tronc cérébral présente un profil morphologique associé à un état d’activation différent de celui des animaux contrôles, mais qu’il peut être restauré par un traitement à l’ATS-002. Ces données suggèrent un état inflammatoire anormal chez les animaux Phox2b27Ala/+ qui peut être reversé par l’effet anti-inflammatoire connu de ce composé. Par ailleurs, il a été montré sur culture cellulaire que les extensions polyalanine de Phox2b entraînent la formation d’agrégats protéiques considérés comme toxiques. L’ATS-002 est connu pour avoir des effets anti-agrégants de par son action sur la balance HSP70/90. (3) Par la mesure de quantité de protéines dans le tronc cérébral (western blot) j’ai pu montrer qu’en effet cette balance est retrouvée anormale chez les animaux mutants mais peut être rétablie après traitement. (4) Enfin, en étroite collaboration avec l’équipe du Dr. Jorge Gallego (Paris), nous avons observé un nombre anormalement élevé d’apnées obstructives chez les nouveau-nés Phox2b27Ala/+. La récurrence de ce type d’apnées est à associer à l’existence d’une altération morpho-fonctionnelle du noyau moteur hypoglosse qui contrôle les voies aériennes supérieures. L’ensemble de ce travail de thèse propose donc des pistes originales pour la recherche de composés pharmacologiques susceptibles d’avoir un intérêt thérapeutique dans le cadre du syndrome d’Ondine. Il apporte également des données nouvelles sur la probable existence chez les patients atteints du syndrome d’Ondine d’un terrain inflammatoire et d’une altération de la perméabilité des voies aériennes supérieures, deux anomalies qu’il serait désormais important de prendre en compte dans les approches thérapeutiques appliquées en clinique.
Publication
Obstructive Apneas in a Mouse Model of Congenital Central
Amélia Madani, Gabriel Pitollat, Eléonore Sizun, Laura Cardoit, Maud Ringot, Thomas Bourgeois, Nelina Ramanantsoa, Christophe Delclaux, Stéphane Dauger, Marie-Pia d’Ortho, Muriel Thoby-Brisson, Jorge Gallego, Boris Matrot
Am J Respir Crit Care Med. – 2021 Nov 15
10.1164/rccm.202104-0887OC
Jury
Agnès NADJAR, présidente
Christian STRAUS, rapporteur
Jean-Charles VIEMARI, rapporteur
Christian GESTREAU, examinateur
Xénia PROTON DE LA CHAPELLE, membre invitée et présidente de la société AtmosR
Muriel THOBY-BRISSON, directrice de thèse,